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簡(jiǎn)要描述:PCR實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)、建立系列質(zhì)量管理文件等,確保實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行符合國(guó)家衛(wèi)生部的要求,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、確保實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全,確保實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行 。江西PCR實(shí)驗(yàn)室裝修工程
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江西PCR實(shí)驗(yàn)室裝修工程建立前PCR區(qū)
PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗(yàn)通常應(yīng)經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程若實(shí)驗(yàn)工藝需要還應(yīng)增加樣品粉碎過(guò)程。
一、分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室
所謂分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室是指完成上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn)呈分散布置形式。對(duì)于這種布置形式的PCR實(shí)驗(yàn)室由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易
相互干擾因此無(wú)需特殊條件要求。
二、組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室
所謂組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室, 是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對(duì)于組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)間集中布置容易造成相互干擾因此對(duì)總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入造成污染核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品。如果使用熒光PCR儀擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。
該去專門(mén)用于準(zhǔn)備各種反應(yīng),這個(gè)區(qū)域必須保持干凈,而且沒(méi)有來(lái)自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備,特別是專門(mén)用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。
⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃,在實(shí)驗(yàn)室只涉及到擴(kuò)增一種或少數(shù)幾種特異序列時(shí)這樣做很有用。
⑵如果你的實(shí)驗(yàn)室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟(jì),可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。
⑶作為一個(gè)規(guī)則,應(yīng)該保存一套陰性、弱陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照樣品來(lái)分析樣品配制和PCR前過(guò)程的效率和潔凈程度。而且,你也希望通過(guò)使用一個(gè)已知的弱陽(yáng)性樣品來(lái)驗(yàn)證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴(kuò)增抑制物。
⑷陰性樣品要與每組樣品同時(shí)做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染,陰性對(duì)照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。
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